|
Benzonase核酸酶，
是一種核酸內(nèi)切酶，可將核酸降解成2~5個(gè)堿基的5‘單磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（雙鏈，單鏈，線狀，環(huán)狀）的DNA和RNA而沒(méi)有蛋白裂解活性，又被稱為“全能核酸酶”。Benzonase核酸酶能有效降低蛋白樣品粘度，去除蛋白樣品中核酸的污染，且無(wú)蛋白酶活性殘留，核酸酶活性達(dá)1×106 U/mg蛋白。Benzonase核酸酶在降低粘性的同時(shí)， 也具有多種其他用途，如：減少了樣品處理時(shí)間，增加了蛋白產(chǎn)量，離心時(shí)時(shí)沉淀和上清分離的更徹底，更便于溶液的離心（尤其是超濾）；提高色譜純化的效率等。
本公司Benzonase核酸酶包括四種，分別為不含任何標(biāo)簽的Benzonase核酸酶（科研級(jí)別）、無(wú)內(nèi)毒素Benzonase核酸酶、Strep tagII Benzonase核酸酶（科研級(jí)別）和無(wú)內(nèi)毒素的Strep tagII Benzonase核酸酶，可適應(yīng)不同下游用途的需求。其中Strep tagII Benzonase核酸酶可在消化完核酸后通過(guò)Strep Tactin XT Resin高效去除，而無(wú)內(nèi)毒素的兩種Benzonase核酸酶，內(nèi)毒素含量<40EU/mL（按照單位換算量計(jì)算為，每1000U中含有的內(nèi)毒素<0.15EU），可適用于藥用級(jí)別的研發(fā)和生產(chǎn)。另外，核酸酶殘留可通過(guò)我公司開(kāi)發(fā)的基于 熒光探針的Benzonase核酸酶殘留檢測(cè)試劑盒進(jìn)行評(píng)測(cè)，15min即可完成檢測(cè)，*可檢測(cè)到2ng/ml的核酸酶殘留。
|
用量推薦
|
|
實(shí)驗(yàn)類型
|
電泳蛋白樣品制備
|
非藥物蛋白生產(chǎn)
|
藥物蛋白生產(chǎn)
|
疫苗、病毒生產(chǎn)
|
細(xì)胞藥物
|
|
推薦產(chǎn)品
|
Benzonase(科研級(jí))
|
Benzonase(科研級(jí))
Strep-tagII Benzonase(科研級(jí))
|
Benzonase(無(wú)內(nèi)毒素級(jí))
Strep-tagII Benzonase(無(wú)內(nèi)毒素級(jí))
|
|
細(xì)胞數(shù)量
|
1X106個(gè)細(xì)胞(10mg組織)
|
1g濕重 （重懸液10mL）
|
1L 發(fā)酵上清液
|
1L 培養(yǎng)物
|
|
*用量
|
125U (0.5 μL)
|
25U/mL(1 μL)
|
25U/mL(1 μL)
|
0.1U/mL(0.4 μL)
|
0.1U/mL(0.4 μL)
|
|
推薦用量
|
500U (2 μL)
|
250U/mL(10 μL)
|
250U/mL(10 μL)
|
25U/mL(100 μL)
|
5U/mL(20 μL)
|
|
作用時(shí)間
|
通常作用時(shí)間37℃在15~60min；25℃在30~120min；
|
|
單位定義
|
37℃，pH 8.0反應(yīng)條件下，在30分鐘內(nèi)使△A260 值降低1.0(相當(dāng)于完全消化37 μg DNA )的酶量定義為一個(gè)活性單位。
注意：含大量蛋白、細(xì)胞壁、其它鹽分的粗制品，對(duì)該酶活性有部分抑制作用，使用時(shí)需要增加酶的用量。
|
應(yīng)用
|
-
蛋白提取時(shí)去除核酸污染：在重組蛋白純化或組織細(xì)胞樣品蛋白提取時(shí)，Benzonase核酸酶可有效降低樣品粘度，利于下游操作
-
與細(xì)胞或細(xì)菌裂解液配合使用，去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量
-
減少存放的外周血單細(xì)胞(PBMC)的結(jié)塊現(xiàn)象
-
降解核酸，利于不可溶性蛋白復(fù)性前高質(zhì)量包涵體制備
-
有效去除帶負(fù)電荷的核酸對(duì)雙向SDS-PAGE蛋白樣品的影響，改善蛋白質(zhì)的分離效果，增強(qiáng)2-DE分辨率
-
疫苗和病毒樣品制備中DNA污染的去除
|
儲(chǔ)存
|
|
置于-20°C，可保存2年。
|
