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產地 | 國內 |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZW7200 |
用途 | 僅用科研 |
包裝規格 | 25T /50T |
是否進口 |
產品名稱:鵝源性成分(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
包裝:25T 50T
分類:pcr-熒光試劑盒
用途:本產品僅供科研與實驗使用,不用于臨床診斷等
目的:本試劑盒適用于檢測疑似感染者或發病動物等組織、體液或淋巴結等標本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。
鵝源性成分(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時, 探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成完全同步。
鵝源性成分(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
在PCR 管中加入下列成分:
樣本采集、存放及運輸: 1、樣本采集:各類型樣本按照常規方法采集; 2、-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其 他試劑。 3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。 使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 1. 用自選方法純化 N+2 個樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取 試劑盒兼容。 2. 如果有 N 個樣品,則需要做 N+2 個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一 個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求 的樣品起始量)中加 10μL 人多瘤病毒 7 PCR 陽性對照的 10000倍稀釋 液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后 得到模板 DNA放 冰上待用。 二、設置 PCR 反應(40μL 體系) 3. 對 N+2 個樣品,在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性 對照,故需要設置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分: 成分 N+2 個
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注意事項
:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區)
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關說明書;陽性質控品及陰性質控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準備(PCR前準備區)
取N個(N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品)PCR反應管,每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s,轉移至樣本處理區。
2.加樣(樣本處理區)
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉移至擴增區。