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產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZW0728 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號 | |
是否進口 |
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱:馬動脈炎病毒(EAV)核酸檢測試劑盒
(RT-PCR 熒光探針法)
Name :Diagnostic Kit for Equine Arteritis Virus RNA
(RT-PCR Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】48 份/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒適用于檢測的*組織、全血等標本中馬動脈炎病毒 RNA,適用于馬
動脈炎病毒感染的輔助診斷。其檢測結(jié)果僅供參考。
【檢驗原理】
本試劑盒用一對馬動脈炎病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光探針,用一步
法熒光 RT-PCR 技術(shù)對馬動脈炎病毒 RNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑
感染者的病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
名 稱 規(guī) 格
酶液 50μl×1 管
EAV 反應(yīng)液 1.0ml×1 管
EAV 陽性質(zhì)控品 50μl ×1 管
陰性質(zhì)控品 250μl ×1 管
說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
【儲存條件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復(fù)凍融少于 5 次,
有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ
Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測儀。
【標本采集】
病死動物,取*組織 2g;待檢活動物,抽取全血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管。
【保存和運輸】
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標
本運送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復(fù)凍融。
【使用方法】
1. 樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
每份組織分別從 3 個不同的位置稱取樣品約 1g,手術(shù)剪剪碎混勻后取 0.05g 于
研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管
中,8000rpm 離心 2min,取上清液 100uL 于 1.5mL 滅菌離心管中。
ELISA常見問題:馬動脈炎病毒(EAV)檢測試劑盒(RT-PCR熒光探針法)
利用ELISA進行檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
1、抗原:ELISA抗原有三類:液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。
純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強,合成抗原一般都是多肽抗原,
試劑盒一般為基因重組抗原。抗原純度不高,特異性就不強,
2、抗體特異性和親和力的大小會影響試劑盒的特異性和敏感性
3、酶結(jié)合物,試劑盒的保存時間通常由酶的穩(wěn)定性決定。
最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。
ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液(PBS)
堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了,因為殘留的PBS會抑制一半的酶活性。
TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)(OPD對機體有突變作用,所以改用TMB)
◆ 注意事項
1.本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染,實驗要分區(qū)操作。
1)第一區(qū):樣本制備區(qū)。
2)第二區(qū):模板添加區(qū)。
3)第三區(qū):擴增及產(chǎn)物分析區(qū)。
★ 分區(qū)之間*進行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
2.實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套,不同區(qū)域獨立使用工具,需更換手套和實驗服。
3.嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4.反應(yīng)液中的成分對光敏感,應(yīng)避光保存。試劑使用前要完全解凍,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測頻次將反應(yīng)液以適當體積分管保存。
5.反應(yīng)結(jié)束后,擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄,當日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
6.不同批號試劑請勿混合使用,在有效期內(nèi)使用。