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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZ-75264 |
用途 | 僅限科研 |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | |
適應(yīng)物種 | |
檢測限 | 詳見說明書 |
數(shù)量 | 99 |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記物 |
純度 | 詳詢客服% |
樣本 | 玉米、花生、飼料、食用油 |
應(yīng)用 | 僅科研 |
是否進(jìn)口 |
黃曲霉毒素總量(Aflatoxins Total)ELISA檢測試劑盒上海滬崢現(xiàn)貨供應(yīng),全國免費快遞運輸,質(zhì)量保證!試劑盒檢測樣本的靈敏度和準(zhǔn)確度高,歡迎新老客戶咨詢訂購
黃曲霉毒素總量(Aflatoxins Total)ELISA檢測試劑盒產(chǎn)品詳細(xì)說明:
規(guī)格:96T
一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中黃曲霉毒素的殘留量。
二、適用范圍
定量檢測玉米、花生、飼料、食用油等樣品中黃曲霉毒素的殘留。
三、試劑盒特點及技術(shù)指標(biāo)
* 檢 測 時 間 : 30 min
試劑盒靈敏度: 0.1 ppb(μg/kg)
* 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值<1 ppb
酶標(biāo)免疫測定程序
① 將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,待其完全回 升至室溫(20~25℃)后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
② 按標(biāo)準(zhǔn)品和樣品雙孔平行的數(shù)量使用微孔。
③ 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品、抗體:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣品50μL
到對應(yīng)的微孔中,加入黃曲霉毒素總量酶標(biāo)物50 μL /孔,再加入黃曲霉毒素總量抗體50μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)20 min。
④ 洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,加入洗滌工作液250 μL/孔,每次靜置20 s,甩去孔內(nèi)液體,重復(fù)洗滌3次,*一次用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
⑤ 顯色:加入底物液A液50 μL/孔,再加底物
液B液50 μL/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)10 min。
⑥ 測定:加入終止液50 μL/孔,用酶標(biāo)儀立即 測定450 nm處的吸光度值(建議用雙波長450/630 nm)檢測。
七、 結(jié)果判定
以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以黃曲霉毒素總量標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ppb)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉毒素總量實際濃度。(詳見試劑盒專業(yè)分析軟件,以便進(jìn)行大量樣本的分析計算。)
樣本處理及要求
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
嘔吐毒素(Deoxynivalenol)ELISA檢測試劑盒注意事項:
① 洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
② 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
③ 不使用過了有效期的試劑盒,不交換使用不同批號的試劑。
④ 0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)時,表示試劑可能變質(zhì)。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后,一般顯色時間為15~20min即可。若顏色較淺,可延長反應(yīng)時間到30min,反之則減短反應(yīng)時間。
貯藏條件: 2~8℃