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產地 | 國產 |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HZ-75233 |
用途 | 僅限科研 |
包裝規格 | 20T/50T |
純度 | 詳詢客服% |
CAS編號 | |
是否進口 |
上海滬崢專業生產銷售豬偽狂犬病PCR診斷試劑盒現貨,我公司供應的分子生物學試劑品類齊全,且具有優勢價格,歡迎新老客戶咨詢認購。
產品詳細信息
【用途】 用于豬偽狂犬病的檢測、診斷和流行病學調查。
【操作步驟】
1. 病料處理
取適量病料大腦、扁桃體、肺臟等組織,于滅菌研缽充分研磨,用PBS液按照1:3稀釋成均勻乳劑,-20℃反復凍融3次以上。
2 . DNA的抽提
(1) 取已凍融好的病料,8000r/min離心5min,取上清500μl(或質控樣品T,500μl),加50μl SR-I和6μl SR-II,50℃水浴1~2h,并不時顛倒混勻一下;
(2) 加入等量酚:氯仿(1:1),漩渦振蕩20秒,4℃,12000r/min,離心5min;
(3) 取上清,加入等量氯仿,振蕩混勻,4℃,12000r/min,離心5min;
(4) 取400μl上清,加入800μl無水乙醇,再加40μl SR-III,混勻。-20℃放置30~60min,4℃、12000r/min,離心10min,小心棄上清,沉淀即為DNA。用75%乙醇(滅菌雙蒸水配,每次加入500μl)洗滌2次,小心吸去75%乙醇,勿使DNA丟失,室溫晾干或超凈工作臺風干15-25min,加入20μlTU-5溶解即為模板,即用或-20℃保存備用。
3.PCR操作
3.PCR操作
4.電泳
4.電泳:
稱量0.25g瓊脂糖,放入錐形瓶,加入25mL 1×TAE液(可配置50×濃縮液,儲存備用),于微波爐中熔解,加入1.5μl的TU-9混勻。封閉好電泳槽,加入梳子,倒入瓊脂凝膠,待凝固后,將PCR產物6μl混合1.5μl TU-7,加樣于凝膠孔中,同時在相鄰孔加入3μlTU-8,在100v 電壓下,1×TAE液中電泳30分鐘,在紫外成像儀下觀察結果。
【結果判定】
在220bp位置出現擴增帶,實驗結果為陽性
豬偽狂犬病PCR診斷試劑盒
【注意事項】
1. 每次使用,開蓋之前請先瞬時離心,使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存,-20℃保存試劑盡量減少反復凍融,使用后的試劑立即放回,避免在室溫擱置太久。
3. 盡量建立PCR試驗操作區,避免交叉污染。
4. 加樣和反應程序嚴格按照說明書進行,由于操作失誤、移液器不精確、定時不準確造成無結果情況,不予負責。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前,要高壓滅菌,操作過程盡量不要用手接觸到管內壁,可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染,在有效期限前用完。