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小鼠睪酮(T)ELISAkit試劑盒 說明書注意事項:

在收集標本前必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成分是否足夠穩定，我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，請及時儲存在4℃的條件下備用，如有特殊原因需要周期手機標本，請在造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以請避免反復凍融。有代測需求的客戶，取材前請務必和我司銷售人員索要說明書，具體操作事項請與我司技術人員保持聯系。

液體類標本：

包括血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細胞培養上清液等。

血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如保存過程中如有沉淀，請再次離心。

血漿：

應根據標本的要求選擇EDTA，檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，在離心20分鐘（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如保存過程中有沉淀，請再次離心。

尿液：

用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如保存過程中有沉淀，請再次離心。

細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，當細胞濃度達到100萬/ml左右，通過反復凍融，使細胞破壞并釋放細胞內的成份，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，如保存過程中有沉淀，請再次離心。

組織標本：

切割標本后，稱取重量，加入一定量的PBS（PH7.4），用液氮迅速冷凍保存備用，標本融化后仍保持2-8℃的溫度，加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清，分裝后留一份待檢測，其余冷凍備用。

小鼠睪酮(T)ELISAkit試劑盒 說明書實驗步驟：

1.標本的采取和保存:

可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。

2.試劑的準備:

按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

3.加樣:

在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

4:保溫:

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。

5.洗滌:

洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELISA是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相。

小鼠睪酮(T)ELISAkit試劑盒 說明書訂購流程：

1.絕大部分產品備有現貨，一般情況下都能訂貨當日發貨。
2.部分非常用產品，需提前1－2日預訂，訂購進口ELISA試劑盒，則需要提前1-2周時間預訂。
3.部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化，若有變動以訂貨當日*報價為準。
4.每日訂單截止時間為17：30整，因超過截止時間造成當日不能發貨的將于次日安排發貨。
5.訂貨，咨詢請致電我司銷售人員或QQ線上報價，如需產品圖片，電子檔中英文說明書等請留下您的EMAIL郵箱，微信，QQ等聯系方式

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