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產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
保存條件 | 2-8 |
品牌 | 上海滬崢 |
貨號 | HS3249 |
用途 | 僅用科研 |
檢測方法 | 酶聯(lián)免疫 |
保質(zhì)期 | 6個月 |
適應(yīng)物種 | 人 |
檢測限 | 詳見說明書 |
數(shù)量 | 99 |
英文名稱 | Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA kit |
包裝規(guī)格 | 48T/96T |
標(biāo)記物 | HRP標(biāo)記物 |
樣本 | 血清/血液/尿液/組織 |
應(yīng)用 | 僅科研 |
是否進(jìn)口 | 否 |
滬崢供應(yīng)是真正的“即用”試劑盒。不需添加試劑或進(jìn)行設(shè)置的試劑盒。我們的試劑盒——只需打開盒子,一切就緒。簡易實(shí)用的檢測方法大大的減小了出錯機(jī)率。
中文名稱:人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA試劑盒
英文名稱:Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
種屬:人
特色運(yùn)輸 順豐速運(yùn) 獨(dú)特優(yōu)勢 特異性強(qiáng),重復(fù)性好,批間差小
用途 科研課題專用,不得用于臨床診斷
操作實(shí)驗(yàn)步驟:
1.標(biāo)本的采取和保存:
可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
2.試劑的準(zhǔn)備:
按試劑盒說明書的要求準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。自配的緩沖液應(yīng)用pH計(jì)測量較正。從冰箱中取出的試驗(yàn)用試劑應(yīng)待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗(yàn)不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保存。
3.加樣:
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。加標(biāo)本一般用微量加樣器,按規(guī)定的量加入板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以免發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規(guī)定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液,再在其中加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物應(yīng)用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
4:保溫:
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。
5.洗滌:
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相。
免
滬崢生物試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA).往預(yù)先包被間接膽紅素(IBIL-)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并 洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的間接膽紅素(IBIL-)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
免責(zé)聲明:
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。