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中文名稱：人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA

英文名稱：Human heparin cofactor Ⅱ,HCⅡELISA kit

人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒 成及試劑配制 :

1. 酶聯板：一塊(96孔) 

2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內配制。

如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔)，實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。

7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋

人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA產品優勢：

1.精心挑選的抗體，對照品/標準品，顯色劑和酶標板全部為進口產品實現*性能，原材料批量進口加上自配的特殊配方稀釋劑保證高品質產品性能的同時兼顧成本。

2..采用先進專利技術，嚴格按照標準生產方案組裝生產，預包被微孔板的批內和批間變異系數均小于10 ％。

3.經過嚴格交叉反應和干擾測試及穩定性試驗，實驗結果穩定可靠。

4.明確的敏感度，針對所有樣品類型達到*的性能，廣泛的檢測范圍可以滿足大多數檢測要求。

5.強大的生產能力和充足的儲備、操作熟練的技術人員及高效的生產流程，隨時可以組裝出您定制的產品。

6.完善的售后服務和免費的技術支持免去您的后顧之憂。

人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA實驗步驟：

1.標本的采取和保存:

可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定（如血清、尿液），有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。

2.試劑的準備:

按試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水，包括用于洗滌的，應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

3.加樣:

在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出，不可產生氣泡。加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。

4:保溫:

在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后?？乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有最貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其后加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應總是需要一定時間的溫育。

5.洗滌:

洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELISA是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相。

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