按抗體說明書建議的稀釋倍數，用 TBST 溶液稀釋一抗。如果未取得理想實驗結果，則參照一般推薦的稀釋倍數上下浮動一個數量級進行一抗稀釋進行預試驗，然后根據試驗結果選擇合適稀釋倍數，一抗濃度過高會導致產生非特異性條帶，過低會導致條帶較淡或得不到條帶。